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技術文章

通用型細胞周期流式細胞分析試劑盒產品說明書

點擊次數:16673   發布時間:2023/11/6 21:15:12

主要用途

通用型細胞周期流式細胞分析試劑是一種旨在通過細胞流式儀測定細胞中DNA結合染料程度,來定量DNA含量,以進一步獲取細胞周期分布狀況的權威而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種細胞(動物、人體、植物、昆蟲等)的細胞周期分析。可以被用于細胞凋亡、信號傳遞、細胞分裂、代謝等的研究。產品嚴格無菌,即到即用,分辨率高,操作簡捷,性能穩定。

 

技術背景

細胞周期是評價細胞代謝、生理和病理狀況的重要指標。通過DNA結合染料,借助細胞流式儀,測定出DNA含量,根據DNA含量隨著細胞周期的不同而發生變化,來確定和區別細胞周期的不同階段。流式細胞術(FLOW CYTOMETRY)是七十年代發展起來的集計算機、激光、流體力學、細胞化學、細胞免疫學為一體的高科學技術。凋亡細胞是在正常G0/G1峰細胞群前出現亞二倍體峰(sub-G1)細胞群。

 

產品內容

清理液(Reagent A)    毫升

裂解液(Reagent B)    毫升

染色液(Reagent C)    微升

去干擾劑(Reagent D)    毫升

保存液(Reagent E)毫升

產品說明書1份

 

保存方法

保存去干擾劑(Reagent D)在-20冰箱里,其余的保存在4冰箱里;染色液(Reagent C)避免光照,有效bao6月

 

用戶自備

HANKS平衡鹽溶液(G&VS12022)或PBS緩沖溶液(G&VS12033):用于清洗細胞

胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液(G&VS12024):用于細胞脫離

wan全細胞培養液(G&VS12052):用于中和胰蛋白酶的處理

15毫升錐形離心管:用于細胞收集的操作

1.5毫升離心管:用于細胞染色的容器

臺式離心機:用于細胞收集的操作

細胞流式儀:用于細胞熒光分析

 

實驗步驟

實驗開始前,將-20℃冰箱里的試劑盒中的去干擾劑(Reagent D)置入冰槽里融化。移出xx微升裂解液(Reagent B)到新的1.5毫升離心管,加入xx微升染色液(Reagent C)xx微升去干擾劑(Reagent D),混勻后標記為1號工作液;再移出xx微升保存液(Reagent E)到新的1.5毫升離心管,加入xx微升染色液(Reagent C),混勻后標記為2號工作液。工作液置于暗室里,避免光照。然后進行下列操作。

 

1. 準備1瓶25cm2細胞培養瓶的待測細胞,鋪滿率達70%(約1百萬細胞數)

2. 小心移出細胞培養液到15毫升錐形離心管(收集漂浮細胞)

3. 加入2.5毫升用戶自備的HANKS平衡鹽溶液或PBS緩沖溶液到細胞培養瓶,覆蓋培養瓶表面

4. 小心移出2.5毫升清洗液到上述15毫升錐形離心管

5. 加入1毫升胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液到細胞培養瓶,鋪滿整個培養平面

6. 置入37培養箱1分種

7. 振動培養瓶,使細胞脫落,然后加入5毫升用戶自備的wan細胞培養液

8. 移入到上述15毫升錐形離心管(懸浮細胞從這一步驟開始)

9. 放進臺式離心機離心5分鐘,速度為300g

10. 小心抽去上清液

11. 加入xx毫升清理液(Reagent A)15毫升錐形離心管混勻

12. 放進臺式離心機離心5分鐘,速度為300g

13. 小心抽去上清液

14. 加入500微升1號工作液,用200微升槍頭上下輕柔抽吸,混勻細胞顆粒群(可以移入到1.5毫升離心管或細胞流式儀專用測試管)

15. 在暗室里室溫下孵育60分鐘

16. 加入500微升2號工作液,用200微升槍頭上下輕柔抽吸,混勻

17. 移入到細胞流式儀專用測試管(可放進4℃冰箱里待測)

18. 即刻進行細胞流式儀分析:波長488nm氬離子激光(或488nm激發波長,610nm散發波長)觀察50000個細胞以上

 

注意事項

1. 本產品為100次操作

2. 建議操作時,在無菌狀態下進行

3. 確保實驗準確性,須收集所有懸浮和貼壁細胞

4. 可用35mm培養皿或6孔培養板,細胞總量不得少于30萬

5. 操作時,須戴手套

6. 孵育時,必須避免光照

7. 建議細胞染色完成后,即刻進行細胞流式儀分析。如果放進4℃冰箱里待測,不要超過10天

8. 細胞流式儀分析前,須混勻內容物

9. 細胞檢測量不得少于10000個

10. 告知流式儀技術員有關細胞類型

11. 本公司提供系列細胞周期分析試劑產品

 

質量標準

1. 本產品經鑒定性能穩定

2. 本產品經鑒定熒光清晰

 

使用cheng

極威生物秉著“信譽至上、客戶滿意、質量cheng”的宗旨為我們的用戶提供you產品和服務。用戶收到貨后,應按照產品說明書上的規定妥善保管并在有效期內使用。我們的產品在銷售前已作嚴格的質量鑒定,bao說明書所述的使用效果。在貨到后10天內若發現確屬本產品的質量問題,請立即以書面形式(實驗報告)與本公司聯系,并將該產品退回,經檢驗確系產品質量所致,本公司負責更換產品。如系使用者錯誤操作所致,本公司不承擔由此造成的損失。

 

友情提醒

IF IT DOESN’T WORK, RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

 

訂購信息

單組分訂購信息

編號名稱規格

G&VS10021.1通用型細胞周期流式細胞分析試劑盒100次

G&VS10021.1A清理液(Reagent A)毫升

G&VS10021.1B裂解液(Reagent B)毫升

G&VS10021.1C 染色液(Reagent C)毫升

G&VS10021.1D 抗干擾劑(Reagent D)毫升

G&VS10021.1E 保存液(Reagent E)毫升

G&VS12022 HANKS平衡鹽緩沖溶液毫升

G&VS12024胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液毫升

G&VS12033 PBS緩沖溶液毫升

G&VS12052 DMEMwan細胞培養液毫升

 

試劑盒訂購信息

產品編號

名稱

規格

G&VS10021.1

通用型細胞周期流式細胞分析試劑盒

100次

G&VS10021.2

細胞周期藍色熒光流式細胞分析試劑盒(紫外波長,無需固定和透膜處理)

100次

G&VS10021.3

細胞周期碘化丙啶(PROPIDIUM IODIDE)紅色熒光流式細胞分析試劑盒

100次

G&VS10137.1

雙參數細胞周期G0期流式細胞分析試劑盒

10次

G&VS10137.2

雙參數細胞周期G1期流式細胞分析試劑盒

10次

G&VS10137.3

雙參數細胞周期S期流式細胞分析試劑盒

10次

G&VS10137.4

雙參數細胞周期G2期流式細胞分析試劑盒

10次

G&VS10137.5

雙參數細胞周期M期流式細胞分析試劑盒

10次

G&VS10137.6

多參數細胞周期全周期流式細胞分析試劑盒

10次

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