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技術文章

真菌/酵母細胞樣品細胞周期SYTOX綠色熒光流式細胞分析試劑盒產品說明書

點擊次數:16662   發布時間:2023/11/6 21:18:29

 主要用途

 

真菌/酵母細胞樣品細胞周期SYTOX綠色熒光流式細胞分析試劑是一種旨在通過細胞流式儀測定真菌/酵母細胞中DNA結合SYTOX綠色染料程度,來定量DNA含量,以進一步獲取細胞周期分布狀況的權威而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種真菌/酵母細胞,包括芽殖酵母、裂殖酵母等的細胞周期分析。可以被用于細胞凋亡、信號傳遞、細胞分裂、代謝等的研究。產品嚴格無菌,即到即用,分辨率高,操作簡捷,性能穩定。

 

技術背景

 

芽殖酵母(Saccharomyces cerevisiae)、裂殖酵母(Schizosacchromyces pombe)是研究真核生物細胞周期的模式生物。細胞周期是評價細胞代謝、生理和病理狀況的重要指標。通過DNA結合染料,借助細胞流式儀,測定出DNA含量,根據DNA含量隨著細胞周期的不同而發生變化,來確定和區別細胞周期的不同階段。流式細胞術(FLOW CYTOMETRY)是七十年代發展起來的集計算機、激光、流體力學、細胞化學、細胞免疫學為一體的高科學技術。凋亡細胞是在正常G0/G1峰細胞群前出現亞二倍體峰(sub-G1)細胞群。SYTOX綠色染料具有不受細胞數量變化、染料濃度變化、細胞形態和大小變化,以及細胞培養液不同等影響,且不易滲漏等優點。

 

產品內容

 

清理液(Reagent A    毫升

固著液(Reagent B    毫升

抗干擾液(Reagent C    毫升

酶解液(Reagent D    毫升

染色液(Reagent E    毫升

產品說明書    1

 

保存方法

 

保存抗干擾液(Reagent C、酶解液(Reagent D)和染色液(Reagent E)在-20℃冰箱里,其余的保存在4℃冰箱里;染色液(Reagent E避免光照,有效bao6

 

用戶自備

 

15毫升錐形離心管:用于樣品操作的容器

2毫升離心管:用于細胞染色的容器

(微型)臺式離心機:用于樣品操作操作

培養箱或恒溫水槽:用于反應孵育

細胞流式儀:用于細胞熒光分析

實驗步驟

 

1. 準備5 X 106的待測真菌/酵母細胞 

2. 放進微型臺式離心機離心1分鐘,速度為16000g

3. 小心抽去上清液

4. 加入xx毫升清理液(Reagent A15毫升錐形離心管混勻

5. 放進微型臺式離心機離心1分鐘,速度為16000g 

6. 小心抽去上清液

7. 緩慢加入xx毫升預冷的固著液(Reagent B,且渦旋震蕩混勻

8. 放進4℃冰箱里孵育16小時

9. 放進微型臺式離心機離心1分鐘,速度為16000g 

10. 小心抽去固著液

11. 加入xx毫升清理液(Reagent A15毫升錐形離心管混勻

12. 移入到2毫升離心管

13. 放進微型臺式離心機離心1分鐘,速度為16000g

14. 重復清洗一次

15. 加入xx抗干擾液(Reagent C,混勻

16. 放進37恒溫水槽,孵育216小時

17. 放進微型臺式離心機離心1分鐘,速度為16000g

18. 加入xx酶解液(Reagent D混勻

19. 放進37恒溫水槽,孵育20分鐘

20. 放進微型臺式離心機離心1分鐘,速度為16000g

21. 加入xx清理液(Reagent A,混勻

22. 放進微型臺式離心機離心1分鐘,速度為16000g 

23. 小心抽去上清液

24. 加入xx微升染色液Reagent D,混勻細胞顆粒群

25. 超聲處理100瓦,30%功率,15

26. 在暗室里37培養箱里孵育30分鐘

27. 移入到細胞流式儀專用測試管(可放進4℃冰箱里待測)

28. 即刻進行細胞流式儀分析:波長488nm氬離子激光出現色熒光(或488nm激發波長,530nm散發波長)觀察50000個細胞以上

 

注意事項

 

1. 本產品為50次操作

2. 操作時,須戴手套

3. 孵育時,必須避免光照

4. 建議細胞染色完成后,即刻進行細胞流式儀分析。如果放進4℃冰箱里待測,不要超過1

5. 細胞流式儀分析前,須混勻內容物,或超聲處理,避免細胞成團

6. 細胞檢測量不得少于10000

7. 告知流式儀技術員有關細胞類型

8. 使用未經染色的細胞進行FSCSSC設定,然后將染色細胞調整到未經染色細胞的水平,包括FL1、FL2、FL3PMT

9. 建議設定:

Detector FSC E00  Gain2

Detector FL1-A Voltage400  Gain4

流速:500/

10. 本公司提供系列細胞周期分析試劑產品

 

質量標準

 

1. 本產品經鑒定性能穩定

2. 本產品經鑒定熒光清晰

 

使用cheng

 

極威生物秉著信譽至上、客戶滿意、質量cheng的宗旨為我們的用戶提供you產品和服務。用戶收到貨后,應按照產品說明書上的規定妥善保管并在有效期內使用。我們的產品在銷售前已作嚴格的質量鑒定,bao說明書所述的使用效果。在貨到后10天內若發現確屬本產品的質量問題,請立即以書面形式(實驗報告)與本公司聯系,并將該產品退回,經檢驗確系產品質量所致,本公司負責更換產品。如系使用者錯誤操作所致,本公司不承擔由此造成的損失。

 

友情提醒

 

IF IT DOESN’T WORK, RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG

 

訂購信息

 

單組分訂購信息

 

編號名稱規格

G&VS10021.5     真菌/酵母細胞樣品細胞周期SYTOX綠色熒光流式細胞分析試劑盒50

G&VS10021.5A 清理液(Reagent A毫升

G&VS10021.5B 固著液(Reagent B毫升

G&VS10021.5C 抗干擾液(Reagent C毫升

G&VS10021.5D 酶解液(Reagent D毫升

G&VS10021.5E 染色液(Reagent E毫升

 

試劑盒訂購信息

 

產品編號

名稱

規格

G&VS10021.1

通用型細胞周期流式細胞分析試劑盒

100

G&VS10021.2

細胞周期藍色熒光流式細胞分析試劑盒(紫外波長,無需固定和透膜處理)

100

G&VS10021.3

細胞周期碘化丙啶(PROPIDIUM IODIDE)紅色熒光流式細胞分析試劑盒

100

G&VS10021.4

真菌/酵母細胞樣品細胞周期碘化丙啶(PROPIDIUM IODIDE)紅色熒光流式細胞分析試劑盒

50

G&VS10021.5

真菌/酵母細胞樣品細胞周期SYTOX綠色熒光流式細胞分析試劑盒

50

原創作者:上海極威生物科技有限公司

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