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技術文章

通用型細胞核形態染色/細胞凋亡檢測試劑盒2024年說明書

點擊次數:16644   發布時間:2024/2/5 9:44:51

通用型細胞核形態染色/細胞凋亡檢測試劑盒

主要用途

通用型細胞核形態染色/細胞凋亡檢測試劑是一種旨在通過熒光染料與DNA特異性結合,呈現藍色,用于分析和觀察細胞核形態或DNA含量的權威而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種細胞核(動物、人體、植物、昆蟲等)的觀察。可以被用于細胞周期、細胞凋亡、細胞流式儀分析等研究。產品嚴格無菌,即到即用,熒光清晰,操作簡捷,性能穩定。

技術背景

赫斯特染料(Hoechst 33258)為特異性 DNA 活性染料,與 A-T 鍵結合,這種染料對死細胞或固著細胞可立即染色。而活細胞的著色是漸進性的,在 10 分鐘內可達飽和。在熒光顯微鏡下,活細胞核呈彌散均勻熒光,出現細胞凋亡時,細胞核或細胞質內可見濃染致密的顆粒塊狀熒光。在紫外光激發下,呈現明亮的藍色熒光。

產品內容

清理液(Reagent A)         毫升

反應液(Reagent B          毫升

染色液(Reagent C          微升

產品說明書                           1

保存方式

保存染色液(Reagent C)在-20冰箱里,用鋁箔封裹,避免光照;其余的保存在4冰箱里,有效bao6

用戶自備

胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液(G&VS12024):用于細胞脫離

wan全細胞培養液(G&VS12052):用于中和胰蛋白酶的處理

15毫升錐形離心管:用于細胞收集的容器

1.5毫升離心管:用于細胞染色的容器

微型臺式離心機:用于細胞收集的操作

倒置熒光顯微鏡:用于觀察細胞核形態

細胞流式儀:用于細胞熒光分析

實驗步驟

實驗開始前,從-20冰箱里取出染色液(Reagent C,置入冰槽里融化。移出xx微升反應液(Reagent Bxx微升染色液(Reagent C到新的1.5毫升離心管,混勻后標記為染色工作液。然后進行下列操作。

一、 直接法

1. 準備1個細胞培養12孔板的待測細胞,每孔鋪滿率達70%(約30萬細胞數)

2. 小心抽去細胞培養液

3. 輕輕沿著孔壁加入xx毫升 清理液(Reagent A到細胞培養孔,覆蓋培養孔表面

4. 小心抽去xx毫升 清理液(Reagent A

5. 加入xx微升含有反應液(Reagent B染色液(Reagent C染色工作液 覆蓋培養孔表面

6. 在暗室里室溫下孵育2分鐘

7. 即刻在倒置熒光顯微鏡下進行觀察:紫外波長350nm(細胞核呈現藍色)

二、間接法

1. 準備1個細胞培養12孔板的待測細胞,每孔鋪滿率達70%(約30萬細胞數)

2. 小心移出細胞培養液到15毫升錐形離心管(收集懸浮細胞)

3. 加入xx毫升 清理液(Reagent A到細胞培養孔,覆蓋培養孔表面

4. 小心移出xx毫升 清理液(Reagent A15毫升錐形離心管(收集洗脫細胞)

5. 加入500微升用戶自備的胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液,鋪滿整個培養孔表面

6. 放進37培養箱孵育1分種

7. 輕輕手擊震動培養板,使細胞脫落

8. 加入1毫升用戶自備的wan細胞培養液

9. 移入15毫升錐形離心管

10. 放進臺式離心機離心5分鐘,速度為300g

11. 小心抽去上清液

12. 加入xx微升清理液(Reagent A

13. 200微升槍頭上下輕柔抽吸,混勻細胞顆粒群

14. 轉入到1.5毫升離心管或細胞流式儀專用測試管

15. 加入xx微升含有反應液(Reagent B染色液(Reagent C染色工作液

16. 輕度渦旋震蕩2

17. 在暗室里室溫下孵育2分鐘

18. 即刻移取50微升在載玻片上壓片,

19. 在倒置熒光顯微鏡下進行觀察:紫外波長350nm(細胞核呈現藍色)

20. 或即刻進行細胞流式儀分析:紫外波長350nm觀察50000個細胞以上

注意事項

1. 本產品為100次(812孔細胞培養板)操作

2. 所有操作均須無菌狀態下進行

3. 確保實驗準確性,須收集所有懸浮和貼壁細胞;同時要確保足夠的細胞數

4. 可用35mm培養皿、6孔培養板或25cm2細胞培養瓶操作,相應增加染色液的用量。但12孔培養板為理想選擇

5. 操作時,須戴手套

6. 孵育時,須避免光照

7. 建議細胞染色完成后,即刻進行分析;若暫不觀察,可保存在4℃冰箱里,但不宜超過1

8. 細胞核呈現多個散在塊狀結構,為細胞凋亡

9. 細胞流式儀分析前,須混勻內容物

10. 細胞流式儀分析,細胞檢測量不得少于10000

11. 告知流式儀技術員有關細胞類型

12. 本公司提供系列細胞核染色分析試劑產品

質量標準

1. 本產品經鑒定性能穩定

2. 本產品經鑒定熒光清晰

使用cheng

極威生物秉著信譽至上、客戶滿意、質量cheng的宗旨為我們的用戶提供you產品和服務。用戶收到貨后,應按照產品說明書上的規定妥善保管并在有效期內使用。我們的產品在銷售前已作嚴格的質量鑒定,bao說明書所述的使用效果。在貨到后10天內若發現確屬本產品的質量問題,請立即以書面形式(實驗報告)與本公司聯系,并將該產品退回,經檢驗確系產品質量所致,本公司負責更換產品。如系使用者錯誤操作所致,本公司不承擔由此造成的損失。

友情提醒

IF IT DOESN’T WORKRECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG

訂購信息

單組分訂購信息

 

編號                    名稱                   規格

 

G&VS10023.1     通用型細胞核形態/細胞凋亡檢測染色試劑盒      100

G&VS10023.1A    清理液(Reagent A                       毫升

 

G&VS10023.1B    反應液(Reagent B                   毫升

 

G&VS10023.1C     染色液(Reagent C                    毫升

 

G&VS12024      胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液               毫升

 

G&VS12052       DMEM完quan細胞培養基                   毫升

 

 

試劑盒訂購信息

產品編號

名稱

規格

G&VS10023.1

通用型細胞核形態染色/細胞凋亡檢測試劑盒

100

G&VS10023.2

PROPIDIUM IODIDE細胞核形態染色/細胞凋亡檢測試劑盒

100

G&VS10023.3

CHROMOMYCIN A3細胞核形態染色/細胞凋亡檢測試劑盒

50

G&VS10023.4

吖啶橙acridine orange細胞凋亡染色試劑盒

50

G&VS10092.1

HOECHST 33342PROPIDIUM IODIDE細胞膜變檢測試劑盒

50

G&VS10092.2

吖啶橙acridine orange和溴化乙錠ethidine bromide雙染細胞凋亡檢測試劑盒

50

G&VS10092.3

 吖啶橙Acridine Orange/赫斯特33342HOECHST33342雙染細胞凋亡檢測試劑盒

50

G&VS10092.4

 吖啶橙Acridine Orange/碘化丙啶PROPIDIUM IODIDE雙染細胞凋亡檢測試劑盒

50

 

原創作者:上海極威生物科技有限公司

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