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點擊次數:16644 發布時間:2024/2/5 9:44:51
通用型細胞核形態染色/細胞凋亡檢測試劑盒
主要用途
通用型細胞核形態染色/細胞凋亡檢測試劑是一種旨在通過熒光染料與DNA特異性結合,呈現藍色,用于分析和觀察細胞核形態或DNA含量的權威而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種細胞核(動物、人體、植物、昆蟲等)的觀察。可以被用于細胞周期、細胞凋亡、細胞流式儀分析等研究。產品嚴格無菌,即到即用,熒光清晰,操作簡捷,性能穩定。
技術背景
赫斯特染料(Hoechst 33258)為特異性 DNA 活性染料,與 A-T 鍵結合,這種染料對死細胞或固著細胞可立即染色。而活細胞的著色是漸進性的,在 10 分鐘內可達飽和。在熒光顯微鏡下,活細胞核呈彌散均勻熒光,出現細胞凋亡時,細胞核或細胞質內可見濃染致密的顆粒塊狀熒光。在紫外光激發下,呈現明亮的藍色熒光。
產品內容
清理液(Reagent A) 毫升
反應液(Reagent B) 毫升
染色液(Reagent C) 微升
產品說明書 1份
保存方式
保存染色液(Reagent C)在-20℃冰箱里,用鋁箔封裹,避免光照;其余的保存在4℃冰箱里,有效bao證6月
用戶自備
胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液(G&VS12024):用于細胞脫離
wan全細胞培養液(G&VS12052):用于中和胰蛋白酶的處理
15毫升錐形離心管:用于細胞收集的容器
1.5毫升離心管:用于細胞染色的容器
微型臺式離心機:用于細胞收集的操作
倒置熒光顯微鏡:用于觀察細胞核形態
細胞流式儀:用于細胞熒光分析
實驗步驟
實驗開始前,從-20℃冰箱里取出染色液(Reagent C),置入冰槽里融化。移出xx微升反應液(Reagent B)和xx微升染色液(Reagent C)到新的1.5毫升離心管,混勻后標記為染色工作液。然后進行下列操作。
一、 直接法
1. 準備1個細胞培養12孔板的待測細胞,每孔鋪滿率達70%(約30萬細胞數)
2. 小心抽去細胞培養液
3. 輕輕沿著孔壁加入xx毫升 清理液(Reagent A)到細胞培養孔,覆蓋培養孔表面
4. 小心抽去xx毫升 清理液(Reagent A)
5. 加入xx微升含有反應液(Reagent B)和染色液(Reagent C)的染色工作液, 覆蓋培養孔表面
6. 在暗室里室溫下孵育2分鐘
7. 即刻在倒置熒光顯微鏡下進行觀察:紫外波長350nm(細胞核呈現藍色)
二、間接法
1. 準備1個細胞培養12孔板的待測細胞,每孔鋪滿率達70%(約30萬細胞數)
2. 小心移出細胞培養液到15毫升錐形離心管(收集懸浮細胞)
3. 加入xx毫升 清理液(Reagent A)到細胞培養孔,覆蓋培養孔表面
4. 小心移出xx毫升 清理液(Reagent A)到15毫升錐形離心管(收集洗脫細胞)
5. 加入500微升用戶自備的胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液,鋪滿整個培養孔表面
6. 放進37℃培養箱孵育1分種
7. 輕輕手擊震動培養板,使細胞脫落
8. 加入1毫升用戶自備的wan全細胞培養液
9. 移入15毫升錐形離心管
10. 放進臺式離心機離心5分鐘,速度為300g
11. 小心抽去上清液
12. 加入xx微升清理液(Reagent A)
13. 用200微升槍頭上下輕柔抽吸,混勻細胞顆粒群
14. 轉入到1.5毫升離心管或細胞流式儀專用測試管
15. 加入xx微升含有反應液(Reagent B)和染色液(Reagent C)的染色工作液
16. 輕度渦旋震蕩2秒
17. 在暗室里室溫下孵育2分鐘
18. 即刻移取50微升在載玻片上壓片,
19. 在倒置熒光顯微鏡下進行觀察:紫外波長350nm(細胞核呈現藍色)
20. 或即刻進行細胞流式儀分析:紫外波長350nm,觀察50000個細胞以上
注意事項
1. 本產品為100次(8個12孔細胞培養板)操作
2. 所有操作均須無菌狀態下進行
3. 確保實驗準確性,須收集所有懸浮和貼壁細胞;同時要確保足夠的細胞數
4. 可用35mm培養皿、6孔培養板或25cm2細胞培養瓶操作,相應增加染色液的用量。但12孔培養板為理想選擇
5. 操作時,須戴手套
6. 孵育時,須避免光照
7. 建議細胞染色完成后,即刻進行分析;若暫不觀察,可保存在4℃冰箱里,但不宜超過1周
8. 細胞核呈現多個散在塊狀結構,為細胞凋亡
9. 細胞流式儀分析前,須混勻內容物
10. 細胞流式儀分析,細胞檢測量不得少于10000個
11. 告知流式儀技術員有關細胞類型
12. 本公司提供系列細胞核染色分析試劑產品
質量標準
1. 本產品經鑒定性能穩定
2. 本產品經鑒定熒光清晰
使用cheng諾
極威生物秉著“信譽至上、客戶滿意、質量cheng諾”的宗旨為我們的用戶提供you質產品和服務。用戶收到貨后,應按照產品說明書上的規定妥善保管并在有效期內使用。我們的產品在銷售前已作嚴格的質量鑒定,bao證說明書所述的使用效果。在貨到后10天內若發現確屬本產品的質量問題,請立即以書面形式(實驗報告)與本公司聯系,并將該產品退回,經檢驗確系產品質量所致,本公司負責更換產品。如系使用者錯誤操作所致,本公司不承擔由此造成的損失。
友情提醒
IF IT DOESN’T WORK, RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。
訂購信息
單組分訂購信息
編號 名稱 規格
G&VS10023.1 通用型細胞核形態/細胞凋亡檢測染色試劑盒 100次
G&VS10023.1A 清理液(Reagent A) 毫升
G&VS10023.1B 反應液(Reagent B) 毫升
G&VS10023.1C 染色液(Reagent C) 毫升
G&VS12024 胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液 毫升
G&VS12052 DMEM完quan細胞培養基 毫升
試劑盒訂購信息
產品編號 | 名稱 | 規格 |
G&VS10023.1 | 通用型細胞核形態染色/細胞凋亡檢測試劑盒 | 100次 |
G&VS10023.2 | PROPIDIUM IODIDE細胞核形態染色/細胞凋亡檢測試劑盒 | 100次 |
G&VS10023.3 | CHROMOMYCIN A3細胞核形態染色/細胞凋亡檢測試劑盒 | 50次 |
G&VS10023.4 | 吖啶橙(acridine orange)細胞凋亡染色試劑盒 | 50次 |
G&VS10092.1 | HOECHST 33342和PROPIDIUM IODIDE細胞膜變檢測試劑盒 | 50次 |
G&VS10092.2 | 吖啶橙(acridine orange)和溴化乙錠(ethidine bromide)雙染細胞凋亡檢測試劑盒 | 50次 |
G&VS10092.3 | 吖啶橙(Acridine Orange)/赫斯特33342(HOECHST33342)雙染細胞凋亡檢測試劑盒 | 50次 |
G&VS10092.4 | 吖啶橙(Acridine Orange)/碘化丙啶(PROPIDIUM IODIDE)雙染細胞凋亡檢測試劑盒 | 50次 |
原創作者:上海極威生物科技有限公司
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