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細(xì)胞P38激酶總活性光度法定量檢測試劑盒抑制劑篩選
1． 在96孔板上做好相應(yīng)標(biāo)記：背景、完全活性和待測抑制劑樣品
2． 按下表加入試劑，進(jìn)行樣品預(yù)處理
| 內(nèi)容物 | 空背景對照 | 樣本背景 | 完全酶活性 | 待測抑制劑酶活性 |
| 緩沖液（Reagent C） | xx微升 | xx微升 | xx微升 | xx微升 |
| 陰性液（Reagent G） | xx微升 | xx微升 | xx微升 | —— |
| 待測抑制劑 | —— | xx微升 | ―― | xx微升 |
| 用戶自備的純化酶 | —— | —— | xx微升（1毫單位） | xx微升（1毫單位） |
| 96孔板每孔總量 | 空背景對照孔 （40微升） | 樣本背景孔 （40微升） | 完全活性孔 （40微升） | 待測抑制劑樣品孔 （40微升） |
| 輕輕搖動96孔板，混勻，放進(jìn)30℃培養(yǎng)箱里孵育30分鐘。然后進(jìn)行下列操作 | ||||
3． 分別移取xx微升緩沖液（Reagent C）到新的96孔板的所有孔里
4． 分別加入xx微升酶促液（Reagent D）
5． 分別加入xx微升反應(yīng)液（Reagent E）
6． 分別加入xx微升底物液（Reagent F）
7． 輕輕搖動96孔板
8． 在30℃溫度下孵育3分鐘
9． 加入40微升上述預(yù)處理的待測樣品
10． 即刻放進(jìn)30℃酶標(biāo)儀檢測：測讀30分鐘
11． 抑制活性計算：
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王小姐
