B103大鼠神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞極威生物

點(diǎn)擊次數(shù)：1009 發(fā)布時間：2021/6/28 10:53:07

B103大鼠神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞

Catalogue No.: C1586

Product Format: a T25 flask

Culture Properties：貼壁

Complete Growth Medium: 89%H-DMEM+10%FBS+1%雙抗

Atmosphere: air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%

Application: Cells ａnd cancer research

NOTE: FOR RESEARCH USE ONLY.

Components

Item	Specifications
a T25 flask	2X10⁶
Manual	1 copy

Operation steps for cell culture

1. 吸走多余培養(yǎng)基，加入3-5mL PBS后輕輕晃動培養(yǎng)瓶潤洗細(xì)胞；

2. 吸干凈PBS后加入1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA，輕輕搖晃培養(yǎng)皿使胰酶浸沒細(xì)胞表面，培養(yǎng)瓶放37度培養(yǎng)箱消化；
（細(xì)胞對于消化比較敏感，消化過度會嚴(yán)重影響細(xì)胞狀態(tài)，導(dǎo)致細(xì)胞傳代死亡漂浮或者傳代后不長。細(xì)胞消化到細(xì)胞間隙變大但未脫落，可以輕輕吹下時即可終止，禁止消化到細(xì)胞完全漂浮。混勻細(xì)胞時盡量輕柔，不要吹出大量氣泡。）

3. 加入6-8ml完全培養(yǎng)基終止消化，輕輕吹下細(xì)胞混勻；

4. 將混勻的細(xì)胞1000rpm（約150g）離心3min，棄上清，再用新鮮培養(yǎng)基重懸37度培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)；

傳代比例: 不同細(xì)胞生長速度不一，具體傳代比例視細(xì)胞生長速度而定，大部分細(xì)胞適用1:3-1:4傳代，生長較慢的細(xì)胞可以1:2傳代。

Cell cryopreservation

1.凍存液：92%完全培養(yǎng)基+8%DMSO（可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)室條件自行選擇）

2.降溫步驟：4度10min，-20度2h，-80過夜后液氮保存。

Tips：

1. 細(xì)胞經(jīng)過運(yùn)輸后，部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900-1000rpm(約150g)離心3min，棄上清。加5ml PBS重懸細(xì)胞，再900-1000rpm(約150g)離心3min，用新鮮的完全培養(yǎng)基重懸接種到新的培養(yǎng)瓶。第二次PBS重懸是為了去除碎片，如果平時碎片比較少，傳代時可以省略PBS重懸的步驟；如果碎片很多，建議PBS多洗幾次。

2. 細(xì)胞生長不均時，可以將細(xì)胞消化吹散后加入新的培養(yǎng)基重新接種或傳代。

3. 細(xì)胞生長緩慢時，可以選擇提高血清濃度培養(yǎng)（不超過20%），也可以根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)，選擇傳代細(xì)胞到新的培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。

4. 不同細(xì)胞貼壁性差異比較大，所以消化時間差別較大，20s-10min均有可能，具體以細(xì)胞消化到相互分離但未脫落，并可以輕輕吹下為準(zhǔn)，嚴(yán)禁消化到細(xì)胞完全漂浮。客戶消化過度導(dǎo)致細(xì)胞死亡、漂浮、生長緩慢，不提供免費(fèi)售后服務(wù)。

5. 干冰發(fā)貨均為兩支，客戶先復(fù)蘇一支，若復(fù)蘇失敗及時聯(lián)系我方并在我方指導(dǎo)下復(fù)蘇第二支。若客戶同時復(fù)蘇兩支均狀態(tài)不佳，我方不提供免費(fèi)售后服務(wù)。

6. 細(xì)胞狀態(tài)正常時，應(yīng)盡快凍存細(xì)胞保種，凍存后應(yīng)隨機(jī)抽取一支檢測凍存效果。我方不對客戶凍存細(xì)胞導(dǎo)致死亡負(fù)責(zé)，客戶凍存細(xì)胞死亡不提供免費(fèi)售后服務(wù)。

Notice：

客戶收到細(xì)胞有任何疑問請及時致電我們，細(xì)胞收到后1周內(nèi)沒有任何電話，或其他形式回訪，默認(rèn)為細(xì)胞質(zhì)量沒問題，之后出了任何問題不給予免費(fèi)售后。細(xì)胞免費(fèi)售后只提供一次，若重發(fā)后再次培養(yǎng)死亡不再免費(fèi)補(bǔ)發(fā)，細(xì)胞收貨時已經(jīng)死亡或密度不足的除外。

尊敬的客戶：

您好！上海極威生物科技有限公司（Shanghai JIwei Biological Technology Co., Ltd.）成立于上海，是一家專業(yè)從事“產(chǎn)品研發(fā)、市場銷售、技術(shù)服務(wù)”為一體的高科技生物技術(shù)公司。極威生物依托國內(nèi)外技術(shù)研發(fā)人才的優(yōu)勢，由留美資深科學(xué)家與數(shù)位國內(nèi)多年從事生物領(lǐng)域研究的博士、碩士等高校生物領(lǐng)域研究人員共同創(chuàng)立，在科學(xué)研究和醫(yī)療檢測領(lǐng)域享有極高的聲譽(yù)，經(jīng)過多年的努力發(fā)展已成為專業(yè)供應(yīng)各類生物科研用品的公司，長期專注于生物領(lǐng)域，旗下產(chǎn)品種類眾多。極威生物秉承以產(chǎn)品質(zhì)量為根本，以市場需求為導(dǎo)向，以為客戶創(chuàng)造價(jià)值為己任的精神，致力于發(fā)展中國的科研事業(yè)。力求為我國生物科技事業(yè)提供更好的、更專業(yè)性的技術(shù)服務(wù)和科研產(chǎn)品。自公司成立以來，公司的銷售額保持高速增長，企業(yè)規(guī)模不斷擴(kuò)大，研發(fā)產(chǎn)品包括elisa試劑盒，生化試劑盒，動物血制品，抗體，標(biāo)準(zhǔn)品，生化試劑，實(shí)驗(yàn)耗材等10萬余種類，公司長期致力于elisa試劑盒、生化試劑盒的研發(fā)，為客戶提供生化試劑盒、ELISA試劑盒、技術(shù)服務(wù)等一系列實(shí)驗(yàn)代測服務(wù)。

實(shí)驗(yàn)代做服務(wù)：酶聯(lián)免疫ELISA、生化測試、液相氣相檢測、Icp-MS測試、載體構(gòu)建、RACE、全基因合成、線粒體測序、熒光定量PCR、基因克隆、定點(diǎn)突變、染色體步移、基因組全序列獲取、環(huán)境微生物多樣性、微生物基因組測序、微生物菌種鑒定、甲基化分析服務(wù)等,公司本著“質(zhì)量，專業(yè)服務(wù)”的原則，致力于為用戶提供高性價(jià)比的試劑盒和檢測服務(wù)。